Scombrotossina e luminescenza nei prodotti ittici: ruolo di Photobacterium spp

Carlo Cantoni, libero docente in Ispezione degli alimenti di origine animale, Milano                                                                                                                 Stefano Ibba, medico veterinario, Milano

La scombrotossina (istamina), o sgombrotossina, è una tossina alimentare associata al consumo di particolari specie di pesci appartenenti alle famiglie  degli Scombridae e degli Scomberosocidae  principalmente e alle Clupeidae, Engraulidae, Corinefenidae, e Potamidaeae. Essa, di solito, causa una lieve forma  di intossicazione alimentare (talvolta anche fastidiosa) denominata scombrotossicosi, quando ingerita in quantità in quantità sufficiente. L’avvelenamento sgombro tossico è anche conosciuto come avvelenamento da istamina perché questa amina è considerata  il componente tossico principale della scombrotossina in quanto altri componenti possono essere coinvolti. L'istamina è un’amina biologica (C₅H₉N₃) che può essere prodotta dopo la cattura del pesce durante la  sua lavorazione e/o conservazione e può anche essere formata in altri tipi di alimenti per  azione di batteri. La sgombro tossina è stata rilevata in : sgombro, sgombro atlantico, lanzardo, chub sgombro o sgombro japonicus, Biso o tombarello, Plain bonito, palamita, tonno alalunga, albacore, tonno a pinne gialle, Yellofin tuna, tonno rosso, tonnetto striato, tonnetto allettato. E’ stata riscontrata anche in lampuga, Common dolphinfish, alaccia, spratto, sardine, sardella, cheppie, costardella, aringhe, marlin, mahi mahi. Nella letteratura specifica esistono casi secondo i quali la sgombro tossina potrebbe essere prodotta in specie di salmone. In genere le specie forti migratrici con carne rossa  per azione batterica danno luogo ad elevate concentrazioni di istamina durante le fasi di lavorazione e/o conservazione rispetto ai pesci con carne bianca, La  tossina può essere presente, oltre che nel pesce fresco e congelato ma anche  nel pesce inscatolato e  nei prodotti conservati in concentrazioni elevate, tali da provocare intossicazioni. La concentrazione di istamina può  variare considerevolmente fra le differenti parti del pesce o in  scatole di pesce  appartenenti allo stesso lotto. Nella tabella n.1 sono  riportati gli episodi di intossicazione istaminica da pesce per   i quali sono stati identificati i batteri responsabili.                                                                          

Tab.n.1 Casi di intossicazione   da consumo di pesce nei quali sono stati identificati i batteri responsabili 

(Emborg 2007)                                                       

Anno   paese               prodotto         casi    istamina    batteri responsabili  

1955     Giappone       tonno              50       1200          Morganella morganii 

1965     Giappone       tonno              N.R.       N.R.         Morganella morganii                 

1967 Cecoslovacchia tonno              N.R.     120-3100  Hafnia spp.            

1977      USA               tonno               15      1600-9.190 R.planticola                       

2002     Giappone  sardine essicate  1        3.000          P.   phosphoreum

2003 Danimarca  in salsa chili            8    7.100-9100    M. morganii P. phosphoreum   

2004 Danimarca tonno affumicato  2        4.500            P.phosphoreum 

2004 Danimarca tonno affumicato   1        2.000           M.psychrotolerans      

2004 Danimarca tonno cotto conf.  8      6.400            M.morganii                         

2006 Danimarca  tonno                     1      1.100             P.phosphoreum legenda:istamina espressa in ppm                                                                                      N.R. non rilevato                                                                                                  P:Photobacterium- R: Raoultella planticola                                                                                                                            tonno conf.: tonno cotto confezionato in film flessibile                                                      tonno affumicato:a freddo                                                                                                                  

Nella tabella n.2 sono riportate le concentrazioni di istamina(ppm) riscontrate in prodotti della pesca responsabili di intossicazioni                                

Tabella n .2 Concentrazioni di istamina (ppm) presenti in prodotti della    pesca causa di intossicazioni.                                                                                                

Anno      prodotto ittico           casi      istamina                                                    

1973      tonno in scatola          -             1.160                                                             

1984      Mahi-Mahi                   3         1.070-1.950                                                           

1985      Blue fish                        5            2500                                                                 

1991      Scombro                       -           1.178+/-673                                                 

1996      Marlin                           3              841                                                  

1996      tonno                            48         1185-2,719                                                                       1998      tonno                             11         2.745-3245                                                                                                                                               

1999 Marlin                              256        539-56                                                                                 

2001  Scombro in  scatola        3           1.538                                                                                      2003  tonno                                8               914                                                                               

2004  Escolar                             4            4.090                                                                     

2004  tonno                               8             6.430                                                                      

2004  Pesce spada                     4            208-2.415                                           

2005  Escolar                              7            5.810                                                      

2005  tonno                                2            1.738                                                                         

2005 Escolar affumicato          5             2.605-1,705                                                                  

2005 tonno                                6              220                                                               

2006 tonno in scatola               1             335-390                                                     

2006 tonno                                 2             1.050-1.750                                                       

2006 tonno                                  1            100-1100                                                      

da Emborg (2006) Istamina e batteri produttori     

                                                                                 

L’istamina nel pesce e nei prodotti derivati  è prodotta dalla decarbossilazione dell’aminoacido istidina per azione della istidindecarbossilasi batte-rica Batteri come Vibrio spp, Pseudomonas spp.e Photobacterium spp. sono presenti naturalmente nelle acque marine e si trovano,conseguentemente nel corpo dei pesci. Altre specie batteriche,  specialmente le Enterobacteriaceae, sono dei contaminanti provenienti dagli ambienti di lavorazione.Questo secondo  gruppo di  contaminanti è considerato il più importante  quale causa dell’intossicazione istaminica. Specie come Raoultella planticola, Morganella morganii,Hafnia alvei, Morganella psychrotolerans sonoin grado di produrre elevati livelli di istamina a temperature mesofile (18-30°C). Per questa ragione l’istamina è prodotta preferibilmente nelle fasi di  lavorazione e/o conservazione, quindi a temperature elevate sebbene, recentemente, significativi livelli di istamina siano state rilevati in pesci e prodotti rilevati mantenuti al freddo per azione di germi psicrotrofi come Morganella psychrotolerans (Emborg & Coll.2006) e Photobacterium phosphoreum. Vi è evidenza che la decarbossilasi rimanga attiva alla temperatura di refrigerazione,anche se i batteri sono inattivi. Dopo essere stato attivato a temperature elevate,l’enzima può continuare a produrre istamina anche quando il pesce è stato raffreddato correttamente. È anche possibile che l’istamina venga formata nei prodotti cotti in scatola in seguito alla loro contaminazione nelle fasi successive di utilizzazione.  L’istamina  una volta formata è estremamente stabile è non è ridotta dalla cottura,resiste alla sterilizzazione in autoclave e non è ridotta durante il congelamento e il mantenimento allo stato congelato del prodotto ittico. Inoltre livelli   elevati possono trovarsi anche intossicazioni in assenza di alterazione del prodotto ittico. L’enzima istidindecarbossilasi  è inattivato dalla cottura.Oltre al già noto Photobacterium phosphoreum, in tempi recenti sono state isolate altre specie di Photobacterium in grado di formare istamina (HPB o Histamine producing bacteria) (Torido & Coll.  2014), quindi nuove specie potrebbe-ro provocare intossicazioni. Il genere Photobacterium comprende 26 specie e 2 subspecie. I Photobacterium sono germi Gram negativi,anaero-bi facoltativi,mobili comunemente associati con animali marini. Le specie appartenenti al genere sono ampiamente distribuite nelle acque dei mari,nelle acque marine di superficie salate ,nei sedimenti marini,nelle acque salate di lago sulla cute e nell’intestino di animali marini  e negli or-gani luminosi dei pesci.Diverse specie sono luminescenti per l’attività dei  geni LUX (luxCDAEG).                                                                                                          

In base alla temperatura di crescita si dividono in psicrofili,psicotropi (freddo tolleranti) e mesofili, Le specie psicrofile hanno temperature di crescita conprese tra 0 e inferiori a 20°C. La temperatura ottimale di crescita è compresa tra 10-15°C.Le specie psicrotrofe tra 4°C  e oltre i 25°C; le ottimali sono tra 15 e 30°C. Sono quindi in grado di moltiplicarsi a basse temperature preferendo comunque quelle moderate. Le specie mesofile si moltiplicano tra 10 e 15°C fino a 45°C, con ottimali  tra 30 e  37°C.                                                                                                                                                             Le specie mesofile di Photobacterium sono: P.aestuari,P.,P.aphysiae.,  P. aphoticum, P.aquae, P.acquimaris, P. damselae subsp. piscicida,P. histaminum, P.leognathi, P.mandapamensi, P.piscicida, P.rosenberghii, P.sanctipauli.                                                                                                                                             

Le specie psicrofile e psicrotrofe sono:P.angustum,P.damselae subsp. damselae,P.fischeri,P.frigidophiphilum.P.gaetbucolica,P.gagwense., P.halotolerans, P.iliopiscarium, P.indicum, P.jeanii, P.kishitanii, P.lipoliticum, P.phosphoreum, P. profundum, P.swingsii.   

                                                                                                                             

Come prima segnalato, recentemente accanto al già noto P.phosporeum (Torido & Coll.2014) hanno descritto la presenza di altre Photobacterium   ssp.produttrici di istamina in alimenti ittici messi in vendita al dettaglio in Giappone.Precisamente i Photobacterium mesofili: P. angustum,P. acqui-maris, P.leognathii  e gli psicrotrofi P.kishtanii, P.angustum e P. damselae subsp.damselae. Tra questi P.damselae subsp.damselae era prevalente numericamente senza alcuna segnalazione di intossicazione. Rimane però la constatazione che alcuni ceppi delle specie isolate abbiano evidenziato la produzione di più di 1.000 mg/kg di istamina (Bermejob & Coll.2004) con conseguente possibilità di essere potenziali agenti di intossicazione istaminica.nei pesci venduti al dettaglio in Giappone Torido & Coll.(2014) hanno  verificato la presenza del 94,9%  di Photobatteri  nella popolazione batterica contaminante i pesci. Specie isolate frequentemente produttrici di HFP sono state: P.aquimaris e P.Kishitani (Ast & Coll..2007;Yoshizawa & Coll. 2009).Nello studio di Torido & Coll.(2014) viene confermata che la maggiore percentuale dei Photbacterium mesofili HPB producono più di 500 mg/ Kg di istamina,mentre la capacità di produzione degli psicrotrofi /psicrofili è  generalmente inferiore.Tuttavia alcuni ceppi isolati delle specie  P.aquimaris, P.damsilae,P.kishitani,P.iliopiscatorium e,soprattutto P.phosphoreum , producono più di 500 mg/Kg quindi episodi di intossica- zione  potrebbero essere causati da ceppi psicrotrofi/psicrofili di Photobacterium anche quando i pesci sono conservati a basse  temperature per tempi superiori a 5 giorni.I n  proposito il Photobacterium più conosciuto  HFP è Photobacterium phosphoreum che si è reso responsabi le dei quattro casi riportati nelle tabelle.Ilmicrorganismo è anche responsabile di alterare pesci e prodotti a  base di pesce (Dalgard 2006) la sua produzione di istamina in dosi elevate a temperature di refrigerazione è documentata (Okuzumi & Coll.1981;Okuzumi & Coll.1982; Okuzumi & Coll.1984; Morii & Coll.1988) Il P.phosphoreum è stato isolato ed identificato nel 2004 (Kanki & Coll), non cresce senza presenza di sale nel substrato e a temperature superiori a 25°C.Sembra possiile che i ceppi della specie possano costituire due sottospecie in base alla diversa  capacità di produrre istamina. (Dalgaard & Coll. 2006).                                            

Luminescenza - Una seconda  proprietè di Photobacterium spp. è quella di provocare la luminescenza dei pesci mediante l’attività  dei geni LUX.  Essa si manifesta al buio in pesci tenuti a temperature superiori a 10°C.Le specie responsabili sono elencate nella tabella:                                                    

Tabella n.3 Photobacterium spp luminescenti                                                                     

specie                             temperatura di crescita              Nacl (%)                              P.gangwense                               10-45 °C                            0,9-3                                   P.histaminum                              20-40 °C                            2-8                       P.iliopiscarium                            4-22°C                                1-3                                    P.kishitanii                                   4-30°C                                4-30                             

P. leognathi                                 10-30°C                               0,9-3 

P.mandapamensis                      10-30°                                 0,9-3 

P.phosphoreum                          0-25°C                                  02-3,8     

                                              

Identificazione dei Photobacterium                                                                                       

Per l’isolamento di Photobacterium si possono utilizare i seguenti terreni: Photobacterium  agar (Sigma),Photobacterium broth (Himedia),Boss medium (NaCl 30 g; glicerolo 1 g; 10 g di peptone; estratto di carne 3 g;agar 18 g; acqua 1000 ml,pH 7,3 o terreno di Niven &Coll (1981). Per l’identificazione si procede alla valutazione morfologica e alla determinaione di catalasi,ossidasi e crescita in aerobiosi e poi alla determinazione biochimica con API20NE.Per alcuni ceppi e stata applicata la tecnica  PCR.-RFLP.       

                                                                                                 Bibliografia                                                                                                                                 

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Riassunto                                                                                                                                 

Vengono  riportate la produzione di sgombro tossina e di luminescenza dei prodotti ittici da parte di Photobacterium spp  sono descritte in dettaglio. 

                                                                                                                   Summary                                                                                                                        

Scombrotoxin and glowing  of seafoods by Phosporeum spp. have been descrive in the text.Responsable Photobacterium spp have also descrive in detail.

 

                 

                 

                                                                 

                                                                                                                

ARCOBACTER SPP NEll’ACQUA,ANIMALI, UMANI E IN ALIMENTI VEGETALI E DI ORIGINE ANIMALE

Carlo Cantoni, libero docente in Ispezione degli alimenti  di origine animale, Milano.                                                                                                                    

Stefano Ibba, Medico Veterinario, Milano                                                                                                                                       

Gli  Arcobacter sono batteri bastoncellari, spiraliformi, Gram negativi , asporigeni, mobili per mezzo di un flagello  polare situato in una o in entrambi le estremità della cellula. Sono catalasi e ossidasi positivi  e ureasi negativi. Crescono ottimamente in microerofilia (3-10% di O₂) ma anche in condizioni aerobiche ed anaerobiche. La temperatura ottimale di crescita è compresa tra 25-35°C (minima  15°C   ,massima tra 32 e 42°C).Il pH ottimale di sviluppo è   compreso tra,5 e 8,5.La loro crescita non avvie-ne in substrati con Aw inferiori a 0,98.Sopravvivono a 4° C   diminuendo nel tempo  gradualmente. Il congelamento del substrato di crescita a -20° causa una riduzione iniziale del loro numero seguita da stabilizzazione della loro vitalità. Le cellule in crescita esponenziale sono più sensibili al freddo. Sono rapidamente inattivati dal riscaldamento a 55°C.I valori D in ambiente liquido  a 50 C sono di : 5,12- 5,80 min; a 55°C:0,38-0,76 min.; a 60°C :0,07-0,12min.Nelle carni di suino ,i valori D sono : 18,51 min.a 50 °C e 2,10 min. a 55°C    Non crescono a pH inferiori a 5.Sono in grado di moltiplicarsi in presenza del 3,5 % di NaCl; alcuni ceppi possono crescere in substrati con il 4-5 % di NaCl.Sono inibiti dagli acidi citrico e lattico in concentrazioni dello 0.2 % e di citrat trisodico allo 0,5%.Sono rapidamen-       te inattivati entro  60 sec. da una concentrazione di cloro di 0,46 mg/L. (Altekruse  & Coll. 2002;Lehner & Coll.2005).                                              Fanno parte del genere Arcobacter, famiglia Campylobacteriaceae, ordine Campylobacteriales,,classe Epsilonproteobacteria, phylum Proteobacteria. Attualmente si conoscono 19 specie riportate nella tabella n 1                     

Tabella 1

Species	Source
A. nitrofigilis	Radici di Spartina alterni flora (Canada) e
A. cryaerophilus	Cervello, feto di aborto bovino (Irlanda)
A. butzleri	Feci umane diarroiche(USA)
A. skirrowii	Feci, agnello con diarrea (Belgio)
A. cibarius	Carcasse di broiler (Belgio)
A. halophilus	Laguna con acqua ipersaata (USA)
A. mytili	Cozze (Spagna)
A. thereius	Aborti suini (Danimarca)
A. marinus	L'acqua di mare associata a stella di mare (Corea)
A. ellisii	Cozze(Spagna)
A. molluscorum	Molluschi (Spagna)
A. trophiarum	Suini all’ingrasso (Belgio)
A. defluvii	Liquami (Spagna)
A. bivalviorum	Cozze(Spagna)
A. venerupis	Vongole(Spagna)
A. cloacae	Liquami (Spagna)
A. suis A.anaerophilus	carne di maiale (Spagna) Liquami (Spagna)

Nella  figura seguente sono riportate le probabile vie di contaminazione da Arcobacter spp-

Figura 1 Vie di Trasmissione di Arcobacter     

Presenza di Arcobacter in animali sani.                                                              

Arcobacter spp. sono presenti  nel tratto digerente di animali sani senza causare segni clinici di malattia (Hume & Coll.2001).La presenza di Arcobacter spp. nelle feci di bovini sani,suini,pecore e cavalli è  stata segnalata da diversi ricercatori (Ho & Coll.2006).   

Le percentuali di positivi rilevate  in vari paesi sono state:         

GIAPPONE-bovini  3.6 %,suini  10 %                                                                           

BELGIO: bovini 39 %,suini 44 %                                                                                                                 

INDIA: bovini 10-12 %,POLLAME 8%.                                                                                   

USA: 7,2- 36,4 %  

(Ho & Coll.2006,Mohan & Coll.2014)                                                              

La specie più isolata di frequente è stata A.butzleri,seguita da A.cryaerohilus e  A.skirrow                         

                                                                                                    

Presenza di  Arcobacter spp.in alimenti di origine animale

Nella tabella n.2 sono riportate le percentuali di positività di Arcobacter spp isolate da differenti alimenti di origine animale.                                              

Tabella n.2

Percentuali di presenza di Arcobacter spp in alimenti di origine

AUSTRALIA: carne di manzo  22%,carne di agnellone 15%,carne suina 29 %,carne di pollo 73%.                                                                                                                         BELGIO: carne di manzo  ,31,3%, carne bovina 37 %, carne trita bovina 9%,carne di coniglio 10%,carne suina 53 %,latte bovino 3,18%.                                                              

EGITTO : carne di coniglio 75%.                                                                                

GIAPPONE :carne di manzo 22 %, carne di pollo  49 %,carne suina 7%                     

KOREA:carne  di pollo 22,2 %.                                                                                     

INDIA:carne di pollo 10%,carne di manzo 7,5% carne suina 5% 

MALAYSIA: carne di  manzo 38%, carne di manzo 26,3 0%,latte bovino        

MESSICO: carne di manzo 28 %, carne suina 51,5 %,carne di pollo 40%.                                              

NORD  IRLANDA: carne di manzo  34 %,latte bovino 46 %,carne suina 35 %. carne di pollo 62 %.                                                                                                 

OLANDA: carne trita bovina 1,3 %.                                                                               

SPAGNA: carne di manzo  31,3 %,carne suine 53 %,carne di pollo  64 %,carne di anatra 40 %,carne di tacchino 33,3 %.molluschi 100 %,cozze 41,1 %.   

TURCHIA: carne trita  bovina  37%,carne di pollo 68 %, carne di tacchino 4%.                                                                                                                                        

TAILANDIA: carne di pollo 100 %.                                                                                    

USA: carne suina 30 %,carne trita suina 54 %, carne di pollo 84 %.                                                                                           

Presenza di Arcobacter spp nelle acque.     

                                                   

Molte ricerche hanno dimostrato la presenza di Arcobacter in vari tipi di acque: di superfice, piovane, acque potabili, liquami non trattati e acque marine ( Etonsi 2013).Inoltre altri studi hanno dimostrato che l’acqua funge da veicolo per trasportare Arcobacter  ad esseri umani, animali e ai vegetali (Shah & Coll.2012,Gonzales & Coll.2011).Si  ritiene che Aerobacter nelle acque siano stati : responsabile di gastroenteriti in almeno tre episodi (Rice& Coll.1999,Fong & Coll.2007, Kopilovic & Coll.2008).                                                                                                                     

Presenza di Arcobacter spp. nei vegetali       

                                                                               

La prima segnalazione  della presenza di Arcobacter spp (A.butzleri) è stata comunicata da  Gonzalez & Coll.(2011) che hanno constatato la presenza di A.butzleri nel 20% di lattughe coltivate in Spagna.Dopo questa segnalazione anche Hausdorf- Herford (2012) ha registrato la presenza di A.butzleri e A.cryaerophilus nelle acque utilizzate per la lavorazione di carote e spinaci.Le stesse specie erano  risultate presenti anche nei due vegetali. La fonte originaria rappresentata dall’acqua e l’aumento delle malattie da consumo di alimenti vegetali necessitano l’adozioni di metodi per il controllo della presenza di patogeni  in questi alimenti.  

                                                                                                        

Contaminazioni  per contatto.        

                                                                               

La contaminazione per contatto con cani e gatti domestici è stata ipotizzata ma non confermata, mentre è possibile  la contaminazione  di alimenti vegetali coltivati da parte di animali selvatici (Collado & Coll.2011).                                                                                                                      

Arcobacter patogeni per l’essere umano e per animali allevati.  

    

Sebbene la loro patogenicità debba essere completamente chiarita,alcune specie sono considerate patogene zoonotiche  potenziali.Attualmente 3 specie si sono dimostrate responsabili di infezioni nell’essere umano.L’acqua e alimenti di origine animale insufficientemente cotti o contaminati dopo cottura sono stati identificati come fonti di questi  microrganismi   (Vandamme &Coll.1992,Duffy & Coll.2012,Van Abeele & Coll.2014) . A.butzleri è  la specie più frequentemente isolata dagli umani, mentre  A.cryaerophilus lo è meno frequentemente. Casi di enteriti,coliche e setticemie   provocati dall’associazione di A.butzleri e A.cryaerophilus,sebbene quest’ultimo sia risultato   presente nell’intestino di esseri umani sani (Collado & Coll.2009).Recentemente A.skirrowii è stato riconosciuto causa di batteriemia e colite in un paziente (Collado & Coll.2009). Dal 2002 la International Commission on Microbial Specifications for Foods ha classificato queste specie come patogeni emergenti.Con una ricerca specifica sulla presenza di feci  di pazienti affetti da enteriti acute,Van Abeele & Coll.(2014)  li hanno riconosciuti come quarto patogeno enterico.                                                                                                                         

Negli animali e negli alimenti derivati  sono state identificate le specie A.butzleri,A.cryaerophilus, A.skirrowii,A.cibarius,A.thereius, e  A.trophiarum.  Sebbene queste specie siano state associate con malattie negli animali allevati,esse sono anche colonizzatrici negli animali sani (Ho &Coll.2006).   Negli animali A.butzeri e una terza specie l’A.skirrowii sono responsabili diarree ed aborto. I principali serbatoi sono bovini, pecore, suini e polli. Pure gli equini possono essere importanti. Arcobacter spp. sono state isolate da intestini,placente e feti di questi animali,e sono anche stati isolati dal latte crudo di bovine affette di mastite e dalle feci di pollo. Gli stessi batteri sono stati isolati ovunque dagli stessi animali sani. Le informazioni sulle  trasmissione,colonizzazioni  intestinali,  e la virulenza nell’essere umano ed animale dei membri  del genere Arcobacter sono, per il momento sono insufficienti. La presenza di geni della virulenza e la loro distribuzione entro il genere è stata dimostrata,ma il loro ruolo nella patogenicità esercitata nei gruppi animali specifici non è stata ben dimostrata. (Bucker &Coll.2009) . i geni presunti di virulenza: sono  gli omologhi della fibronectin binding protein CadF e Cj1349,la proteina invasina CiaB,il fattore di virulenza Mvin,la fosfolipasi PldA,l’emolisina TlyA, il gene irgA,che codifica una proteina della membrana esterna regolante il ferro., il gene hecA ,facente parte della famiglia dell’emoagglutinina, il gene hecB codificante una proteina attivante l’ emolisina (Douidah & Coll.2012).                                                                             Terreni per l’isolamento di arcobacter spp dalle feci e dalle carni. Per l’isolamento di Arcobacter dalle feci sono stati proposti numerosi terreni,secondo un lavoro di Merga & Coll.(2011) hanno determinato,quale terreni più rispondenti,la combinazione i terreni HCC (Houf broth con piastre di mCCDA-CAT piastre con incubazione in aerobiosi Per le carni e le feci Milesi  (2010) ha proposto l’impiego di una metodica d’isolamento mediante l’insemenzamento diretto delle spugne utilizzate per il prelievo dalla superfici delle carni in AEB (Arcobacter enrichment broth) + CAT (Cefoperazone,Amfotericina B,Teicoplanina)Selective Supplement Oxoid.incubando in aerobiosi. Dopo incubazione  a 30°C per 4-5 gg dalbterrenodi arricchimento si prelevano O,2 ml di brodo deponendoli  filtri di acetato di cellulosa con pori  0,45 millimicron posti su una piastre di terreno TSA Blood agar per rimuovere altri enterobatteri.I filtri sono poi rimossi dopo un ora e le piastre sono incubate aerobicamente e incubate a 30°C.A crescita avvenuta le coloie sono isolate e identificate con la PCR multiplex.Una metodica simile  con alcune varianti dovute al tipo di alimento   è stata adottata da Gonzalez & Coll.per i vegetali con ottimi risultati.      

Considerazioni finali      

Generalmente la maggior parte dei laboratori d’analisi   non usano appropriati terreni colturali o metodiche in grado di valutare la presenza di specie batteriche simili alle Campylobacter spp quindi dati sull’incidenza e l’importanza clinica nella specie umana delle Arcobacter spp,rimane scarsa.                                                                                                      

Riassunto .                                                                                                                                  

E’riportata la presenza di Arcobacter spp,patogene nell,acqua.animali.essere umano e in alimenti vegetali e di origine animale          

Summary                                                                                                                                    

Pathogen Arcobacter spp in Water,Animals.Humans,and  in plant  and  in  foods of animal origin.                                                                                              

The presence of pathogen Arcobacter spp in water,animal humans ,in plant  foods and in animal origin foods have been described in detail    

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